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生物通報道 Promega公司近日宣布推出NanoBRET™ 蛋白相互作用分析。這種分析利用新的生物發光共振能量轉移（BRET）技術，讓研究人員能夠實時監控活細胞中的蛋白相互作用。

研究蛋白相互作用的傳統方法通常是在體外開展的，只使用了蛋白片段，無法在細胞環境的背景下提供數據。然而，檢測結果欠缺在細胞水平的驗證而缺乏說服力，還需要進行細胞學檢測來驗證。而對于NanoBRET™ 蛋白相互作用分析，研究人員能夠利用全長的蛋白質，在活細胞水平研究蛋白相互作用的誘導和抑制。

BRET的原理是：當兩個蛋白分子相互作用，一個蛋白融合表達的供體螢光素酶蛋白（傳統使用Renilla 海腎螢光素酶）酶學反應所產生的發光信號光譜與另一個蛋白標記的受體熒光基團的激發光譜相重疊，誘發受體分子發出熒光。與熒光共振能量轉移（FRET）相比，BRET不需要激發光，背景更低。

NanoBRET™ 分析是大幅度改良的BRET 分析平臺，使用NanoLuc® 螢光素酶作為能量供體，而HaloTag蛋白標記的NanoBRET™ 618 熒光基團作為受體。來自NanoLuc 供體的明亮藍移發光信號耦合到遠紅移的HaloTag 受體上后，光譜疊加更佳、信號更強，背景更低。

與傳統的BRET方法相比，NanoBRET™ 分析中作為供體的型NanoLuc® 螢光素酶蛋白光信號更強，與受體熒光基團的波長配對更理想。它使用的Flexi載體技術進行克隆，更簡單省時。同時，Promega提供商品化預構建載體，可節省自行構建載體的時間，應用更方便。

Flexi 載體克隆系統是基于兩個稀有酶切位點的限制性內切酶，SgfI和PmeI，這種技術能夠快速、、高保真性地在不同 Flexi. 載體間轉移蛋白編碼區，而無需重新測序。NanoBRET™ PPI Flexi Starter System 提供了以Flexi 載體系統為基礎進行蛋白相互檢測的解決方案，包括載體，檢測試劑及陽性對照。

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