產品名稱：小鼠胚胎成纖維細胞

英文名稱：NIH/3T3

培養(yǎng)基：DMEM-H*培養(yǎng)基：90%DMEM-H+10%FBS

形態(tài)：成纖維細胞樣，長梭形，網狀交織，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長，不產色素，背景干凈，無空泡

生長條件：培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣

生長特性：貼壁生長

儲存方式：液氮

應用領域：與原始的隨機交配3T3和近交系BALB/c 3T3建株方法-樣, NIH/3T3 ,是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸抑制 的連續(xù)細胞株。為了培育在形態(tài)學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了五輪以上亞克隆。 這株細胞對DNA轉化及轉染研究十分有用。檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性

傳代方法：

復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1分鐘內全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9ml犕耆嘌睦胄墓苣冢?000-1200rpm/min離心5分鐘，棄去上清液，用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰霉（0.25%Trypsin 0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰霉，加入5-6毫升*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。

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